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核酸擴增檢測分析儀

【導讀】

核酸擴增檢測分析儀是一種用于擴增和檢測核酸序列的實驗室設備。它在分子診斷領域有著廣泛的應用,包括傳染病的診斷、遺傳疾病的篩查、法醫學鑒定等。

恒溫擴增技術基于在固定溫度下進行核酸序列的特異性擴增。該技術利用光學系統將激發光匯聚在待測核酸樣品上,并通過光學元件接收擴增產物產生的發射光(如熒光或濁度引起的光強變化),從而實現核酸的檢測。恒溫擴增技術包括環介導等溫擴增(LAMP)和鏈置換擴增(SDA)等方法。

熒光PCR技術是一種常見的核酸擴增方法,通過在設定溫度條件下進行熱循環,利用熒光信號的變化來檢測核酸擴增的過程。該技術通常包括多個步驟:核酸提取、純化、擴增和檢測。熒光PCR儀可以分為實時熒光定量PCR儀和非實時熒光定量PCR儀,前者能夠進行定性和定量分析。

多重PCR技術在同一反應體系中同時擴增多個核酸靶標,常用于同時檢測多種病原體或基因變異。

微流控芯片技術利用微流控芯片進行核酸擴增,具有體積小、操作簡便、靈敏度高等優點。根據熒光通道的數量,微流控芯片核酸擴增儀可分為單通道和多通道設備。

全自動一體化設計:許多核酸擴增檢測分析儀采用全自動一體化設計,操作簡便,無需復雜的培訓即可輕松掌握。例如,EasyNAT核酸擴增檢測分析儀(多通道)就是全自動一體化的,與適配試劑配合使用,用于樣本基因的核酸擴增與分析。

快速檢測能力:部分核酸擴增檢測分析儀能夠在短時間內完成樣本的核酸檢測。例如,晶芯?RTisochip?-W 高通量恒溫擴增微流控芯片核酸分析儀可在50分鐘內完成樣本的核酸檢測;而BG-NOVA-X8一體化核酸快速檢測系統則能在30分鐘內完成擴增檢測。

便攜性:一些核酸擴增檢測分析儀體積小,可便攜,適合現場檢測使用。例如,SWM-01核酸擴增檢測分析儀體積小,便于攜帶,適合現場檢測。

低試劑消耗:部分設備設計注重節約成本,試劑消耗量少。例如,SWM-01核酸擴增檢測分析儀強調試劑消耗量少,節約檢測成本。

高通量:一些設備具有高通量的特點,能夠同時處理多個樣本。例如,Cobas 8800可以在8小時內分析最多960個樣品;而GP2000全自動核酸提取及熒光PCR分析系統則擁有96通量。

微流控技術:部分設備采用微流控技術,提高了檢測的靈敏度和準確性。例如,晶芯?RTisochip?-W 高通量恒溫擴增微流控芯片核酸分析儀結合了微流控技術與恒溫擴增技術;知微生物推出的全自動核酸擴增分析儀(NAT-3000)則結合了分子診斷臨床檢測金標準方法學與微流控芯片的工程學設計。

獨立多通道:一些設備提供獨立多通道選擇,如4/8/16通道,適用于不同的檢測需求。

無需特殊實驗環境:部分設備對實驗環境要求不高,可現場進行快速檢測。例如,EasyNAT核酸擴增檢測分析儀(多通道)對實驗環境無特殊要求,可現場進行快速檢測。

靈敏度高、特異性強:核酸擴增檢測技術具有靈敏、特異、快速、操作簡便等特點,廣泛應用于感染性疾病診斷、遺傳病的輔助診斷、病原體基因分析及耐藥基因檢測、個體化用藥指導等方面。

感染性疾病診斷:核酸擴增檢測技術在感染性疾病的診斷中具有重要作用,例如病毒、細菌等病原體的檢測。例如,恒溫核酸擴增檢測分析儀被用于新冠病毒的快速檢測,適用于醫院和出入境等場所。

遺傳病輔助診斷:該技術也被廣泛應用于遺傳病的輔助診斷,通過檢測特定基因突變來幫助診斷和治療。

病原體基因分析及耐藥基因檢測:核酸擴增檢測技術可以用于病原體基因的分析以及耐藥基因的檢測,這對于感染控制和抗生素使用策略的制定至關重要。

食品安全檢測:在食品安全領域,核酸擴增檢測技術用于檢測食品中的微生物污染,確保食品安全。

農產品檢測:該技術也應用于農產品的質量控制,檢測農產品中的病原體和污染物。

畜牧水產檢測:在畜牧業和水產養殖業中,核酸擴增檢測技術用于檢測動物疾病和水生生物的病原體。

生命科學研究:在生命科學領域,核酸擴增檢測技術用于基因組學、分子生物學、腫瘤學等研究。

法醫學:該技術在法醫學中用于DNA指紋識別和親子鑒定。

臨床診斷:核酸擴增檢測技術在臨床診斷中用于多種疾病的檢測,包括腫瘤、遺傳病、傳染病等。

即時檢測(POCT):核酸擴增檢測技術因其快速、簡便的特點,被廣泛應用于即時檢測領域,如現場診斷、床旁診斷等。

環境監測:例如,空氣中的新冠病毒核酸檢測儀可以用于環境中的病原體監測。

農業應用:在現代農業中,核酸擴增檢測技術用于動植物檢疫、轉基因檢測等。


操作培訓:操作人員應接受專業的培訓,熟悉儀器的使用和維護,了解PCR技術的基本原理。

樣品處理:在處理樣品時,應避免交叉污染。使用無菌技術和一次性耗材,確保樣品的純凈性。

試劑質量:使用高質量的試劑,包括高純度的引物、核苷酸、DNA聚合酶等,以確保PCR反應的效率和特異性。

操作環境:保持實驗室的清潔和無菌,特別是在進行PCR實驗時,應使用專門的PCR實驗室或工作站,以減少氣溶膠污染的風險。

陽性對照和陰性對照:每次實驗都應包括陽性對照和陰性對照,以監控實驗的準確性和排除假陽性或假陰性結果。

儀器校準:定期對儀器進行校準和維護,確保溫度控制的準確性和儀器的穩定性。

數據記錄:詳細記錄實驗條件、樣品信息、試劑批號等,以便于后續的數據分析和問題追蹤。

安全防護:在處理可能含有傳染性物質的樣品時,應采取適當的生物安全防護措施,如穿戴防護服、手套和護目鏡。

廢物處理:妥善處理實驗過程中產生的廢物,包括使用過的試劑管、手套等,遵循當地的生物安全和廢物處理規定。

避免污染:在PCR實驗中,避免使用同一對引物進行多個不同樣品的擴增,以減少交叉污染的風險。

結果分析:對PCR結果進行仔細分析,注意區分特異性擴增帶和非特異性擴增帶,必要時進行序列驗證。

儀器使用記錄:記錄儀器的使用情況,包括使用時間、操作人員、樣品信息等,以便于追蹤和質量控制。

緊急情況處理:了解并準備應對實驗過程中可能出現的緊急情況,如儀器故障、樣品泄漏等。

遵守法規:遵守相關的法律法規和行業標準,確保實驗的合法性和合規性。

持續教育:定期參加培訓和研討會,更新知識和技能,以適應技術的發展和變化。

實驗準備:

確保實驗室環境符合生物安全要求,通常需要在生物安全二級或以上級別實驗室使用。

準備所需的試劑、耗材,并確保它們在有效期內。

樣本處理:

根據樣本類型選擇合適的前處理方法,如使用離心機、組織細胞勻漿儀等設備。

對樣本進行核酸提取,可以使用自動化核酸提取儀或手動方法。

試劑準備:

選擇國家藥品監督管理部門批準的試劑,并按照試劑說明書進行操作。

核酸擴增:

將提取的核酸加入到PCR反應體系中,并進行擴增。

核對擴增程序是否與試劑說明書相符,啟動擴增程序。

結果分析:

擴增完成后,使用核酸擴增檢測分析儀進行結果分析。

根據分析結果進行報告解讀。

質量控制:

實驗室應對檢測體系進行必要的性能驗證,包括精密度和最低檢測限。

做好日常室內質控,按照相關要求規范開展室內質控。

安全管理:

實驗過程中應嚴格執行實驗室操作流程。

使用后的耗材和樣本應按照生物安全要求進行處理。

設備維護:

定期對核酸擴增檢測分析儀進行維護和校準,確保設備的正常運行。

人員培訓:

操作人員應接受專業的培訓,熟悉設備的操作和維護。

記錄和報告:

記錄實驗過程中的所有關鍵信息,并在實驗結束后提供詳細的實驗報告。

  • 索引
  • 核酸擴增檢測分析儀技術原...
  • 核酸擴增檢測分析儀特點
  • 核酸擴增檢測分析儀應用場...
  • 核酸擴增檢測分析儀注意事...
  • 核酸擴增檢測分析儀使用